Laporan Praktikum Trigliserida
Jenis Pemeriksaan : Trigliserida
Metode : PAP – GPO
Prinsip : Trigliserida ditentukan setelah hidrolisis enzim dengan lemak. Indikator quinoneimine dibentuk dari hidrogen peroksida, 4 – aminoantypirine dan 4 – klorofenol di bawah pengaruh katalisis peroksidase..
Trigliserida lipases gliserol + asam lemak
Gliserol + ATP GK gliserol-3-fosfat + ADP
Gliserol-3-fostat + O2 GPO dihidroksiaseton fosfat + H2O2
H2O2 + aminoantypirine POD quinoneimine + HCl + H2O + 4-Klorofenol
Dasar teori :
Kadar trigliserida dalam darah orang yang normal biasanya tidak melebihi 150 mg/dl. Pada beberapa keadaan tertentu seperti : DIABETES MELITUS, Hiperlipidemia, kegemukan dan penyakit bawaan yang lain, kadar trigliserida dapat meningkat melebihi 200 mg/dl, yang sering disebut : Hipertrigliseridemia. Hipertrigliseridemia ini dapat mencapai 500 mg/dl bahkan kadang-kadang mencapai 2000 mg/dl.
` hipertrigliseridemia yang berat dapat mudah dilihat, apabila darah seseorang diendapkan dan tampaklah pada bagian yang atas dari endapan darah (serum) suatu cairan yang keruh. Laboratorium yang baik biasanya memberikan nota pada hasil laboratorium : serum keruh. Untuk mendapatkan hasil yang benar maka kepada setiap penderita yang akan diperiksa kadar lemaknya agar berpuasa 10-12 jam sebelumnya. Alkohol merupakan minuman yang dapat memperberat hipertrigliseridemia.
Meskipun trigliserida tersebut sebetulnya salah satu komponen lemak darah, tetapi naik turunnya kadar trigliserida di dalam darah tidaklah banyak tergantung pada jenis hidrat arang yang kita makan sehari-hari, seperti nasi, (dan golongan tepung-tepungan), gula dan jenis manis-manisan yang lain. Dibandingkan dengan jenis tepung, maka jenis gula atau manis-manisan tersebut akan lebih mudah meningkatkan kadar trigliserida dalam darah bagi orang-orang yang berbakat. Ini disebabkan, karena glukosa mempercepat pembentukan trigliserida dalam hati. Oleh karena itu, maka satu cara untuk menurunkan kadar trigliserida darah adalah mengurangi nasi, pantang gula, dan manis-manisan. Makan sayur-sayuran juga dapat membantu menurunkan kadar trigliserida darah, karena sayur tersebut dapat memperlambat penyerapan hidrat arang dari usus ke dalam darah, sehingga proses pembentukan trigliserida di dalam hati diperlambat juga. Pada orang-orang yang terlalu gemuk (obesitas) atau orang yang mempunyai RBW (Relative Body Weigth) lebih dari 110 pCt, maka proses pembentukan trigliserida di dalam hati akan berlebihan dan lebih sering timbul hipertrigliseridemia. Ini disebabkan, karena pada obesitas insulin tubuh tidak dapat bekerja dengan wajar, sehingga timbul keadaan dengan insulin yang berlebihan (hiperinsulinisme) dengan akibat pembentukan trigliserida yang berlebihan pula. Oleh karena itu penurunan berat badan adalah salah satu usaha untuk menurunkan kadar trigliserida dalam darah.
Reagen :
RGT 15 ml, 100 ml atau 250 ml monoreagen
Pipes buffer (pH 7,5) 50 mmol/L
4-klorofenol 5 mmol/L
4-amooantypirine 0,25 mmol/L
Ion magnesium 4,5 mmol/L
ATP 2 mmol/L
Lipases ≥ 1,3 U/ml
Peroksidase ≥ 0,5 U/ml
Gliserol kinase ≥ 0,4 U/ml
Gliserol-3-fosfat oksidase ≥ 1,5 U/ml
STD 3 ml standar
Trigliserida 200 mg/dl atau 2,28 mmol/L
Fotometer Humalyzer 2000
Persiapan Reagen : RGT dan STD siap pakai
Cara Kerja :
- Disiapkan alat dan bahan
- Untuk sampel dipipet 10 µl ke dalam tabung reaksi
- Untuk standar dipipet 10 µl ke dalam tabung reaksi
- Ditambahkan reagen 1000 µl ke dalam tabung sampel, Blanko, standar
- Homogenkan , inkubasi selama 10 menit pada suhu 20-250C atau 5 menit pada suhu 370C
- Baca absorbennya pada Fotometer Humalyzer 2000
Skema Pemipetan :
Pipet kedalam kuvet
|
Blanko
|
Sampel
|
Standart
|
| Sampel |
-
|
10 µl
|
-
|
| Standart |
-
|
-
|
10 µl
|
| Reagen |
1000 µl
|
1000 µl
|
1000 µl
|
Homogenkan, inkubasi selama 10 menit pada suhu 20-250C atau 5 menit pada suhu 370C
| |||
Sampel : serum
Tidak ada komentar:
Posting Komentar